研究论文
米根霉AS 3.819基因启动子片段的克隆及功能鉴定
姜绍通, 潘丽军, 李兴江, 罗水忠, 吴学凤
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从L-乳酸生产菌米根霉(Rhizopus oryzae)菌株AS 3.819基因组DNA中分别扩增得到了乳酸脱氢酶基因(ldh A)、丙酮酸脱氢酶基因(pdc A)、淀粉糖化酶基因(amy A)以及磷酸甘油酸酯激酶基因(pgk1)的启动子片段,并构建启动子探针载体p UKMR,以β-内酰胺酶基因(bla)为报告基因在大肠杆菌JM109中对这些启动子片段进行筛选及启动活性检测。结果表明:4种启动子片段成功启动报告基因表达;在非底物诱导情况下,ldh A和pgk1启动子启动活性较强;在有合适碳源底物诱导情况下pdc A和amy A启动子拥有更高的启动活性;ldh A基因的启动子启动活性随着启动子片段长度的增加有一定提高,而在长度为500 bp以上时,其启动活性变化不明显。本研究为Rhizopus oryzae提供了一种快速简便的启动子捕获分离及启动活性检测方法。
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学科主题
生物医学Fungal and yeast genetics research
Microbial Metabolic Engineering and Bioproduction · Enzyme Production and Characterization
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